洁净室的送风是通过高效（亚高效）过滤器过滤后进入室内的，可以视为无菌空气，但这一过程并没有杀菌作用。只要室内有人员的活动，就会产尘及产菌。人的皮肤由于新陈代谢会不断脱落皮屑，这可成为微生物生存及繁殖的营养源，在适宜的温湿度条件下，会使微生物迅速繁殖。洁净室最有效除菌方法是采用净化空调系统，但净化空调系统不能提供洁净室的起始无菌状态，用消毒灭菌的方法可弥补这一缺陷。因此，每间洁净室都应有完善的消毒灭菌制度，将净化空调技术与消毒灭菌技术有机地结合起来，以保证室内的洁净无菌环境。

医院洁净室的消毒灭菌方法，主要有紫外线照射、臭氧及化学消毒剂消毒灭菌等方法。洁净室应根据使用特点来确定消毒灭菌方法及周期，有的洁净室需每日消毒，而有的洁净室每周消毒一次即可。如手术室的无影灯位于手术台上方，对手术的影响较大，应每个手术日消毒一次。

一、紫外线灭菌灯照射 属电磁辐射消毒法，其机理是:紫外线照射后，导致蛋白质（尤其是酶蛋白）上残基、氢键和酶的结构破坏，从而使酶失活，微生物死亡；可使蛋白质变性，影响微生物的生长、代谢；核酸吸收紫外线后改变其生物学活性，导致细菌的死亡；可改变DNA的结构，使细胞无法复制，而使微生物死亡。可见，紫外线属广谱杀菌类，能杀死一切微生物。紫外线照射消毒法被广泛应用于医院许多需要消毒的场合，如室内空气、物体表面、水及其他液体等（表面杀菌效果最好）。紫外线杀菌的波长在200～290m，而在250～270nm范围内的杀菌能力最强。

影响紫外线杀菌的主要因素有:

1、灯管使用的时间:一般使用时间为100h。应定期用仪器测试灯管的输出强度，新灯管的紫外线照射强度应大于90μW/cm2，当灯管的紫外线照射强度低于70W/cm2时，应予以更换。

2、环境温度:最适宜的温度为20℃。

3、环境湿度:一般相对湿度在40％～60，紫外线杀菌效果最好，而相对湿度在60％～70％时，紫外线杀菌效果降低，湿度高于80％的环境对紫外线灯的出力影响最大，甚至对细菌有激活作用。

4、照射距离:照射距离与灭菌效果成反比关系实验证明，在距灯管中心近距离范围内，照射强度与距离成反比。

另外，使用紫外线灯管照射时，对需消毒的暴露对象应长时间照射，尽量近距离照射。由于紫外线辐射对人体有伤害，所以只能在无人状态下使用。同时，紫外线只能对静止的物体有灭菌作用，对流动的空气就毫无意义了在组合式空调机组停运时，紫外线照射也可作为机组消毒的一种手段。根据紫外线杀菌的原理制成的专用产品有紫外线空气消毒器、紫外线表面消毒器和紫外线消毒箱等，以其紫外线强度的强弱及与臭氧的结合满足不同的消毒要求。

二、臭氧杀菌 臭氧在常温下是强氧化气体，也是一种广谱杀菌剂。可用以杀灭细菌及其芽孢、病毒及真菌，也被广泛用于洁净室的杀菌。由于臭氧是极不稳定的气体，在常温下会自行分解成为氧气，故不能储存。一般都是通过臭氧发生器现场制备，臭氧为强氧化剂，其杀菌能力极强，对人体及室内某些物体也有损害。所以，用高浓度臭氧杀菌，只能在房间无人状态下进行，杀菌结束30min以后才允许人员进入。

三、化学消毒剂 利用喷雾及熏蒸化学消毒剂的方法杀灭空气中的微生物也是洁净室常用的消毒手段。化学消毒剂有甲醛、过氧乙酸、过氧化氢、含氯消毒剂、季铵盐类等。一般都需关闭门窗1～2h喷雾和熏蒸。还有一些化学消毒剂是可以用来浸泡或擦拭的，如二溴海因、过氧化氢、过氯乙酸等。但无论用什么方法，化学消毒剂对人体及物体都是有不同程度的损害的，在使用时应当经专业人员培训，操作时应谨慎小心，特别是在配制过程中，应对呼吸系统采取保护措施。需要说明的是每个洁净室使用的化学消毒剂应当定期更换，防止室内的微生物产生抗药性。